INSTITUTO TECNOLÓGICO DE CIUDAD ALTAMIRANO
Campos, Ayala W.
CROMATOGRAFÍA EN CAPA DELGADA: SEPARACIÓN DE
FOSFOLÍPIDOS.
FUNDAMENTO TEÓRICO:
Los lípidos
cumplen en el cuerpo humano varias
funciones: son componentes estructurales de las membranas celulares,
constituyen una importante fuente de energía mediante la oxidación de los
ácidos grasos, siendo esta fuente energética acumulada como reserva en forma de
triacilglicéridos en el tejido adiposo. Además existen cuatro vitaminas (A, D,
E y K) de naturaleza lipídica, y de las prostaglandina, sustancias que
intervienen en procesos diversos: como la contracción del músculo liso y la
regulación intercelular, son derivados lipídicos
PROCEDIMENTO
1. Preparación de las
placas: Tomar con pinzas dos portaobjetos limpios y desengrasados; Sumergirlo
en una solución de sílicagel. Dejarsecar en posición horizontal. Llevar las placas a una estufa a 120º durante 1 hora, para
activarlas. Guardarla en un desecador si no se las utilizan de inmediato.
2. Extracción de
fosfolípidos de la yema de huevo: A 1 ml de solución de yema de huevo agregar 4
ml de una mezcla de cloroformo:etanol (2:1); agitar. Separar las fases con una
pipeta Pasteur. Descartar la superior.
3. Siembra del
material: Sembrar una pequeña gota en la fase clorofórmica en un punto medio a 0.5 cm del borde inferior
de la placa. El borde inferior es aquel
hasta el cual llega la capa de
sílicagel, siendo el borde superior aquel
con una franja libre que permita manipular
la placa.
4.
Preparar el Solvente: Cloroformo: metanol: agua (65: 35: 4)
5.
Desarrollo del cromatograma: Colocar la placa con el borde sembrado hacia debajo de modo que la capa
de sílicagel quede sumergida 1 o
2 ml en el solvente (el nivel de este no debe llegar al lugar de siembra).
Tapar la cuba. Dejar correr hasta que el frente de solvente Llegue casi al borde superior. Sacar la placa
de la cuba y dejar secar en posición
horizontal. Tapar la cuba para
evitar la evaporación del solvente.
6.
Revelado de las placas: Colocar las placas en un frasco conteniendo yodo
sólido. Se Produce la tinción de los
lípidos por acción de los vapores de yodo.
RESULTADOS Y OBSERVACIONES
En
esta práctica desafortunadamente no obtuvimos resultados.
BIBLIOGRAFIA
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